選取健康的Balb/c小鼠（n=3），剔除小鼠背部右后側(cè)毛發(fā)后，將100μL的4T1-Luc細(xì)胞注射至小鼠背部右后側(cè)皮下，完成皮下腫瘤種植。于種植完畢后0天、3天和5天對(duì)小鼠腫瘤血管進(jìn)行成像。成像時(shí)，每次將75μL0.5mmol/mL的ErDCNPs通過尾靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)，之后將小鼠以側(cè)臥位固定于光學(xué)平臺(tái)上，使用a640×512pixelInGaAs-NIRvana640LN相機(jī)對(duì)腫瘤進(jìn)行成像，濾波片為長(zhǎng)通1500nm濾波片，曝光時(shí)間為300ms。采集完畢后，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行圖像處理與定量。

小鼠腫瘤血管成像

實(shí)驗(yàn)探究在完成小鼠正常脈管系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)可視化后，為了進(jìn)一步驗(yàn)證Er-DCNPs對(duì)于脈管系統(tǒng)的可視化能力，將Er-DCNPs用于腫瘤成像中，以觀測(cè)腫瘤部位的血管系統(tǒng)，與正常血管相比，腫瘤血管功能與結(jié)構(gòu)異常，異常的結(jié)構(gòu)促進(jìn)了腫瘤的形成、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。因此，準(zhǔn)確評(píng)估腫瘤相關(guān)血管和微血管網(wǎng)絡(luò)可以幫助醫(yī)生們更好的了解腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制。在種植完腫瘤后0d、3d和5d將Er-DCNPs通過尾靜脈打入小鼠體內(nèi)，如圖3.9A所示，0d時(shí)，腫瘤處無清晰血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)出現(xiàn)，信號(hào)呈團(tuán)狀；3d時(shí)，腫瘤形狀清晰可見，腫瘤周圍出現(xiàn)瘤周血管，尤其腫瘤兩側(cè)出現(xiàn)主要血供血管；5d時(shí)，腫瘤體積增大，腫瘤周圍主要血管增長(zhǎng)，腫瘤表面出現(xiàn)細(xì)小、彎曲、復(fù)雜的血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，隨著腫瘤生長(zhǎng)，在體熒光信號(hào)逐漸增強(qiáng)。通過測(cè)量不同天數(shù)的腫瘤血管直徑和血管密度，可以發(fā)現(xiàn)，腫瘤血管的密度與直徑顯著增加，血管直徑由260μm增長(zhǎng)至340μm，血管數(shù)量由2根增長(zhǎng)至5根，說明在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，腫瘤血管從形態(tài)和數(shù)量上均有明顯變化，表明了Er-DCNPs優(yōu)異的時(shí)空分辨率，得益于NIR-IIb區(qū)所帶來的各項(xiàng)成像特性，Er-DCNPs可用于識(shí)別腫瘤相關(guān)的血管，監(jiān)測(cè)腫瘤發(fā)生發(fā)展。

腫瘤血管成像(A)不同天數(shù)腫瘤成像。(B)血管直徑變化。(C)血管數(shù)量變化

淋巴管動(dòng)態(tài)成像

選取健康的C57小鼠（n=3），將小鼠毛發(fā)脫去并麻醉后，以仰臥姿勢(shì)固定于小動(dòng)物成像儀SeriesII900/1700-H中。固定完畢后，將小鼠腹部皮膚剪開，將皮膚固定于兩側(cè)，翻找到髂下淋巴結(jié)，選取長(zhǎng)通1500nm濾波片收集信號(hào)，之后將25μL0.5mmol/mL的Er-DCNPs通過髂下淋巴結(jié)注入小鼠體內(nèi)，注入探針的同時(shí)進(jìn)行拍攝，獲取小鼠淋巴管的動(dòng)態(tài)成像結(jié)果，曝光時(shí)間為100ms。采集完畢后，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行圖像處理與定量。

小鼠脈管系統(tǒng)成像

先使用理發(fā)剪和脫毛膏將小鼠（n=3）的全身毛發(fā)脫去。在小鼠麻醉后，將100μL0.5mmol/mL的Er-DCNPs通過靜脈注射的方式打入小鼠體內(nèi)，將小鼠以仰臥姿勢(shì)和俯臥姿勢(shì)放置于小動(dòng)物成像儀SeriesII900/1700-H下進(jìn)行成像，所選取濾波片為長(zhǎng)通1500nm，曝光時(shí)間為100ms。在局部血管成像實(shí)驗(yàn)中，先將小鼠麻醉并將小鼠放置于光學(xué)平臺(tái)上，之后使用808nm激光器，在400mw/cm2的功率密度下，使用a640×512pixelInGaAs-NIRvana640LN相機(jī)對(duì)小鼠進(jìn)行成像，后肢、背部、耳部、腹部和腦部血管的圖像均在長(zhǎng)通1500nm濾波片下采集，曝光時(shí)間為300ms。采集完畢后，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行圖像處理與定量。

背部脈管系統(tǒng)動(dòng)態(tài)成像

選取健康的C57小鼠（n=3），將小鼠毛發(fā)脫去并麻醉后，以俯臥姿勢(shì)固定于小動(dòng)物成像儀SeriesII900/1700-H中，選取長(zhǎng)通1500nm濾波片收集信號(hào)，之后將100μL0.5mmol/mL的Er-DCNPs通過尾靜脈注射進(jìn)小鼠體內(nèi)，打入探針的同時(shí)進(jìn)行圖像采集，以獲取背部脈管系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)成像結(jié)果，曝光時(shí)間為100ms。采集完畢后，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行圖像處理與定量。

小鼠腹部脈管系統(tǒng)動(dòng)態(tài)成像

選取健康的C57小鼠（n=3），將小鼠毛發(fā)脫去并麻醉后，以仰臥姿勢(shì)固定于小動(dòng)物成像儀SeriesII900/1700-H中。固定完畢后，將小鼠腹部皮膚剪開，將皮膚固定于兩側(cè)，選取長(zhǎng)通1500nm濾波片收集信號(hào)，之后將100μL0.5mmol/mL的Er-DCNPs通過尾靜脈注射進(jìn)小鼠體內(nèi)，打入探針的同時(shí)進(jìn)行圖像采集，獲取小鼠腹部脈管系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)成像結(jié)果，曝光時(shí)間為100ms。采集完畢后，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行圖像處理與定量。

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